「毀滅就是重生的開始，所有犧牲都值得慶祝！」一段神諭般的神秘影片，無預警向海港城政府宣告末日將臨，開啟了全城10幾處連環大爆炸！通往本島唯一道路跨海大橋斷絕，高鐵、隧道甚至南區分局…一個個由人肉炸彈引爆，倒數計時進行著有如天譴般的毀滅行動，而攜帶電磁脈衝（EMP）炸彈金鑰的委員長，也在高速公路上被神秘劫持。 危急時刻，海港城南區分局警官吳英雄(趙又廷飾)與性格迥異的東區分局警探陳真(林更新飾)意外變成搭檔，一個憑直覺，一個求證據，再次挑戰更艱钜的不可能任務！兩人巧遇變成炸彈客的通緝犯徐達夫(黃渤飾)，三人身陷隧道爆炸與神秘組織的夾殺中，讓案情追查更加撲朔迷離…。就在全港備戰神秘邪惡力量之時，最大爆炸襲捲全城，造成電力中斷、飛機墜毀、捷運爆衝，整座城市陷入一片黑暗…。 九死一生之後，吳英雄和陳真才得知徐達夫懷有身孕的老婆(關穎飾)已被神秘組織挾持，並將她的身體作為生化武器「伊魯康吉」的活體試驗。而在三人背後，更駭人的陰謀即將引爆海港城，「夜行者」神秘組織啟動24小時內屠城的枯草計畫，全城封鎖後登場的就是生化病毒的全面擴散。 生化危機一觸即發，軍方派出黑鷹部隊加入搶救人質的行動，南區分局鑑識官藍西英(張鈞甯飾)卻發現神秘組織最核心的秘密！吳英雄與陳真腹背受敵，加上雜牌軍徐達夫的攪局，三人已分不清楚真正的敵人是誰？天黑後終究看不到黎明，考驗正義與邪惡分界的時刻，再度來臨…。