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Stefan Rudolf absolvierte zunächst eine Lehre zum Werkzeugmacher. Erst danach wandte er sich dem Beruf des Schauspielers zu und studierte Schauspiel an der Berliner Universität der Künste.[1] Ein erstes Engagement fand Stefan Rudolf im Jahr 2000 am Deutschen Theater Berlin. Er stand in Einar Schleefs Inszenierung Verratenes Volk auf der Bühne. Es folgten ein Engagement am Jungen Theater Göttingen (2000/2001) und Auftritte an verschiedenen Berliner Bühnen, wie Berliner Ensemble, Theater am Kurfürstendamm und Theaterdiscounter. Im Jahr 2006 nahm er an dem zweisprachigen Theaterprojekt Henrik, Iyver du? – eine deutsch-norwegische Reise teil. Stefan Rudolf wirkt seit 2003 regelmäßig in Film- und Fernsehproduktionen mit. In den Kinofilmen Gisela (2005), Schläft ein Lied in allen Dingen (2009) undGlückliche Fügung (2010) war er jeweils in Hauptrollen auf der Leinwand zu sehen. Er spielte Nebenrollen in weiteren Filmen wie Die Bluthochzeit (2005), Fräulein Stinnes fährt um die Welt (2009) und Laconia (OT The Sinking of the Laconia, 2011) mit. Er übernahm zudem Gastrollen in zahlreichen Fernsehserien, so inVerbotene Liebe, Der Bulle von Tölz, SOKO Leipzig, GSG 9 – Ihr Einsatz ist ihr Leben, Der Landarzt und Tatort. Seit 2012 ist er an der Seite von Katharina Böhmund Jürgen Tonkel in der ZDF-Serie Die Chefin als Kriminalkommissar Jan Trompeter zu sehen. Stefan Rudolf lebt in Berlin.